Expressão do gene da aromatase (CYP19A1) nas células da granulosa murais luteinizadas de mulheres com endometriose submetidas a técnicas de reprodução assistida

Lauriane Giselle de Abreu
In: Universidade de São Paulo · 2009 · doi:10.11606/t.17.2009.tde-27092013-094914 · W1895712713
dissertation OA: gold CC0
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Real-time PCR analysis showed no difference in aromatase (CYP19A1) gene expression in mural luteinized granulosa cells from women with endometriosis compared to controls undergoing assisted reproduction.

One-sentence paraphrase of the abstract; not a substitute for reading it. No clinical advice. How this works

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Este estudo caso-controle investigou se a expressão do gene da aromatase (CYP19A1) difere entre mulheres com endometriose e controles sem endometriose, medindo por PCR em tempo real o RNAm em células da granulosa mural luteinizadas obtidas de folículos pré-ovulatórios durante a hiperestimulação ovariana controlada para reprodução assistida. Foram incluídas 11 mulheres com endometriose e 11 com infertilidade por fatores tubáreo ou masculino, totalizando 12 ciclos no grupo com endometriose e 11 no controle, com RNA extraído e normalizado por ß-actina, e todos os experimentos em duplicata. Não houve diferença significativa na expressão de CYP19A1 entre os grupos, nem quando os casos foram estratificados por grau de endometriose. A conclusão do trabalho aponta que, apesar de evidências prévias de redução de atividade da aromatase em células da granulosa na endometriose, neste contexto a expressão do gene não parece estar alterada. This paper is centrally about endometriosis — it measures CYP19A1/aromatase gene expression in luteinized mural granulosa cells from women with endometriosis undergoing assisted reproduction.

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Abstract

\n Introdução:Até 60% das mulheres com endometriose apresentam como sintoma a infertilidade. Entretanto, os mecanismos envolvidos ainda permanecem não totalmente esclarecidos, especialmente quando não há distorção da anatomia pélvica. A etiologia multifatorial e comprometimento poligênico nesta doença têm sido amplamente aceitos. A aromatase é uma molécula das mais estudadas e há evidências de aumento da expressão do seu gene no endométrio eutópico e ectópico na endometriose. Esta enzima, codificada pelo gene CYP19A1, converte andrógenos a estrógenos e está presente normalmente nas células da granulosa, onde é fundamental para a produção esteroidogênica intrafolicular. Estudos in vitropor cultivo de células da granulosa, mostraram redução da atividade da aromatase em mulheres com endometriose. Devido à escassez de estudos que analisem a expressão do seu gene (CYP19A1) nessas células foi o que estimulou a proposta deste estudo. Este trabalho tem porobjetivo medir a expressão do gene da aromatase por PCR em tempo real nas células da granulosa luteinizadas murais de mulheres com endometriose submetidas a técnicas de reprodução assistida. Pacientes e Métodos: Estudo caso-controle, com 11 mulheres com endometriose e 11 com os fatores tubáreo ou masculino de infertilidade,submetidas à hiperestimulação ovariana controlada (HOC) para reprodução assistida, num total de 12 ciclos para o grupo com endometriose e 11 para o controle. Não houve diferença entre as características clínicas dos dois grupos quanto à idade e parâmetros do ciclo de HOC. As células da granulosa murais foram coletadas de folículos pré-ovulatórios maduros no dia da captação oocitária e isoladas. Posteriormente, procedeu-se à extração do RNA (clorofórmio/ isopropanol) e à transcrição reversa. A PCR em tempo real foi realizada para quantificar os níveis de RNA mensageiro produzidos para o gene da aromatase, normalizados aos produtos do gene endógeno, ß-actina (expressão relativa). Todos os experimentos foram realizados em duplicata. Resultados: não houve diferença na expressão do gene CYP19A1 nas células da granulosa luteinizadas murais de mulheres com endometriose quando comparadas ao grupo controle (p>0,05; Mann Whitney), mesmo na comparação combinada considerando-se separadamente os diferentes graus de endometriose (controle vs. endometriose mínima/leve vs. endometriose moderada/grave, p>0,05;Kruskall Wallis). Conclusão:Os resultados deste estudo sugerem que a aromatase apresenta um mecanismo complexo de controle para sua expressão gênica nas células da granulosa e, apesar de evidências prévias de sua reduzida atividade nessas células na endometriose, a expressão de seu gene parece não estar afetada pela doeça, de acordo com o presente estudo.\n

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