Pathological neurogenesis: a key step in the pathogenesis of pelvic pain caused by adenomyosis

Статья посвящена одной из актуальных проблем клинической гинекологии - тазовой боли при аденомиозе. Цель исследования: изучение морфологических особенностей нервного аппарата миометрия у женщин с синдромом хронической тазовой боли, обусловленной аденомиозом. Методика. Изучено 60 биоптатов, полученных после гистерэктомий у женщин с диффузным аденомиозом ІІ-ІІІ степени, сопровождающимся болевым синдромом выраженной степени тяжести, не получавших гормональную терапию. Группа морфологического сравнения составила 10 биоптатов, полученных у женщин с аденомиозом, без болевого синдрома, прооперированных по поводу аномальных маточных кровотечений, также не получавших гормональную терапию. У всех пациентов получено информированное согласие на использование биологического материала в исследовании. После гистерэктомии участки стенок маток, включавшие эндометрий и миометрий подвергали стандартным гистологическим процедурам, готовили парафиновые срезы (5 мкм). Общую морфологическую оценку проводили при окраске срезов гематоксилином и эозином. Визуализацию нервных волокон осуществляли после иммуногистохимического (ИГХ) окрашивания с использованием моноклональных антител (МАТ) к белкам нейрофиламентов (DAKO, Дания) по инструкциям фирмы. Результаты. Изучение иннервационного аппарата матки при аденомиозе с помощью моноклональных антител к белкам нейрофиламентов выявил разнообразие волокон по толщине, плотности и интенсивности окраски. Плотность нервных окончаний, сопряженных непосредственно с очагами эндометриоза, была невелика - в зоне желез 4,1 ± 0,3 на мм среза, в строме - 9,2 ± 0,6. Тонкие нервные волокна визуализировались преимущественно в строме вокруг кровеносных сосудов, сопровождающих зоны врастания эктопического эндометрия. Густое сплетение тонких нервных волокон также было обнаружено в субсерозном слое. Причем, как в субсерозном, так и в подслизистом слое миометрия превалировали разветвленные тонкие нервные волокна, количество которых статистически значимо (p<0,01) превышало аналогичный показатель в группе сравнения - 17,2 ± 1,4 против 11,8 ± 0,9 на мм. Сравнение иннервационного аппарата матки у женщин контрольной группы и у пациенток с аденомиозом с болевым синдромом позволяет утверждать, что именно расширение иннервационного поля в миометрии является наиболее вероятной причиной формирования тазовой боли у пациенток с аденомиозом. Выводы. Результаты проделанной работы продемонстрировали, что основным местом локализации нервов в матке и потенциальной причиной формирования гипералгезии при аденомиозе является миометрий с формированием аномально избыточного иннервационного аппарата вокруг очагов эктопического эндометрия, в периваскулярных регионах и в строме между пучками гладких миоцитов. Objective. To study morphological features of the myometrium neural apparatus in women with chronic pelvic pain syndrome associated with adenomyosis. Methods. 60 biopsy samples were studied, which were obtained from hysterectomies for grade I-III diffuse adenomyosis associated with severe pelvic pain syndrome. These women did not receive any hormonal therapy. The control group included 10 biopsies obtained from women with adenomyosis who had no pelvic pain syndrome and underwent a surgery for abnormal uterine bleeding. These women did not receive any hormonal therapy either. After hysterectomy, uterine wall samples including endometrium and myometrium were fixed in 10% neutral, buffered formalin (pH 7.4) for 24 hours. After dehydration, the material was embedded in paraffin highly purified with polymeric additives (Richard-Allan Scientific, USA) at a temperature <60°C. Overall morphological evaluation of sections was performed with H E staining. Imaging was performed after nerve fibers immunohistochemical (IHC) staining with monoclonal antibodies (MAbs) to neurofilament proteins (DAKO, Denmark) according to the manufacturer’s instructions. Results. Studying of the uterine innervation apparatus using monoclonal antibodies to neurofilament proteins in adenomyosis identified a variety of fiber thickness, density and color intensity. Density of nerve endings directly associated with endometriosis foci was low; 4.1 ± 0.3 per mm in the glandular zone and 9.2 ± 0.6 per mm in the stroma. Thin nerve fibers were visualized mainly in the stroma around blood vessels associated with the ectopic endometrium ingrowth zone. A dense plexus of thin nerve fibers was also found in the subserosal layer. Furthermore, both in myometrial subserosal and submucosal layers, ramified, thin nerve fibers predominated. The number of such fibers was significantly greater than in the comparison group (17.2 ± 1.4 vs. 11.8 ± 0.9 per mm, p<0.01). Comparison of the uterine innervation apparatus in women with and without chronic pelvic pain syndrome suggested that particularly the expansion of myometrium innervation field was the most likely cause for the development of pelvic pain in women with adenomyosis. Conclusions. The main location of uterine nerves and a potential cause for hyperalgesia in adenomyosis is the myometrium developing abnormally excessive innervation around foci of ectopic endometrium, perivascular areas, and the stroma between fibers of smooth myocytes.