THE ROLE OF NUCLEAR FACTOR NF-kB AND CYTOKINES IN THE PATHOGENESIS OF EXTERNAL GENITAL ENDOMETRIOSIS IN WOMEN OF REPRODUCTIVE AGE

THE ROLE OF NUCLEAR FACTOR NF-kB AND CYTOKINES IN THE PATHOGENESIS OF EXTERNAL GENITAL ENDOMETRIOSIS IN WOMEN OF REPRODUCTIVE AGE - Authors: Ermolova N.V.1, Krukier I.I.1, Grigoryants A.A.2, Botasheva T.L.1, Chaika A.N.1, Bineeva А.R.1, Bondar A.M.1 - Affiliations: - Rostov State Medical University - Stavropol State Medical University - Issue: Vol 29, No 3 (2026) - Pages: 539-546 - Section: SHORT COMMUNICATIONS - Submitted: 27.03.2026 - Accepted: 20.06.2026 - Published: 31.10.2026 - URL: https://rusimmun.ru/jour/article/view/17443 - DOI: https://doi.org/10.46235/1028-7221-17443-TRO - ID: 17443 Cite item Abstract External genital endometriosis (EGE) is a common disorder in women of reproductive age, impacting many aspects of life, including infertility and pain. Along with studies of proliferation, apoptosis, and progesterone resistance in endometriotic heterotopias, attention is currently given to neoangiogenesis, oxidative stress, and inflammation, as well as the role of bioregulators in pathogenesis of this disease. A close link has been proven between EGE development and activation of immune system factors. However, the role of pro- and anti-inflammatory cytokines and nuclear transcription factor (NF-kB) in the pathogenesis of EGE remains poorly understood. The aim of this study was to evaluate the levels of nuclear transcription factor (NF-kB) and cytokine levels in blood serum and peritoneal fluid of patients with EGE in their reproductive age. The study involved 52 patients with EGE and 20 women without EGE (control group). The EGE patients were divided in 2 groups depending on the stage of the disease. Group 1 consisted of 31 patients with stages I-II EGE, group 2 - 21 patients with stages III-IV. The levels of TNFα, IL-8 in blood serum and peritoneal fluid (PF) were determined by ELISA using reagents from Bender MedSystems (Austria); the levels of IL-13, 18, 23, with reagents from Cloud-Clone Corp (USA) according to the manufacturer’s recommendations. Nuclear factor NF-kB was analyzed in peritoneal fluid using kits from Ebioscience (USA). Mathematical processing of the study results was performed using Statistica 10.0. The Mann–Whitney test was used to test the intergroup differences. Statistically significant values were set at p < 0.05. The results demonstrated that EGE is characterized by alterations of the NF-κB signaling pathway and increased synthesis of pro- and anti-inflammatory cytokines at systemic and local levels, which requires further research into the correlation between their levels and disease severity. Dysregulation of immune system confirms the role of inflammatory factors in progression of endometriosis. Full Text Введение Эндометриоз является распространенным заболеванием в популяции женщин репродуктивного возраста, оказывающим влияние на многие стороны жизни, в том числе бесплодие и болевой синдром. Наряду с усилением пролиферации, снижением апоптоза, резистентностью к прогестерону в эндометриоидных гетеротопиях на современном этапе рассматриваются процессы неоангиогенеза, окислительного стресса и воспаления в гетеротопиях, а также определяется значение биорегуляторов в патогенезе этого заболевания [2, 5, 6]. Ядерный фактор транскрипции (NF-kB) вызывает широкий интерес у исследователей благодаря широкому спектру контролируемых генов, центральной ролью в иммунологических процессах и вовлечением в развитие воспалительных заболеваний. Известно, что оксидативный стресс повышает уровни IL-10 в сыворотке крови и перитонеальной жидкости (ПЖ) у пациенток с эндометриозом за счет усиления активности сигнального пути NF-kB, способствующего развитию заболевания [10]. Rho-протеин активирует ядерный транскрипционный фактор (рецептор) NF-kB (NF-kappaB), который, в свою очередь, усиливает продукцию TNFα и повышает транскрипцию NO-синтазы, а также увеличивает стабильность mРНК NOS, способствующую повышению синтеза оксида азота. Отмечается повышение активности макрофагов в ПЖ и эндометриоидных гетеротопиях [2, 6]. Гетеротопический эндометрий приводит к рекрутированию моноцитов из периферической крови в брюшную полость и превращает их в активированные макрофаги. В очагах прогрессии эндометриоза количество М2-макрофагов, секретирующих противовоспалительные цитокины, а также индуцирующие ангиогенез и регенерацию тканей, превалируют над М1-субпопуляцией, отвечающей за противовоспалительный ответ [8]. При развитии эндометриоза происходит активация медиаторов, вовлеченных в функционирование модели так называемого «воспалительного ангиогенеза» [6]. Гены, кодирующие вазоактивные медиаторы, демонстрируют полиморфизмы, предрасполагающие к развитию эндометриоза вследствие промотирования образования внутриклеточных молекул адгезии-1, IL-6 и IL-10 и др. [1, 2, 3, 4], или к развитию рака путем усиления секреции IL-6, IL-8, TNFα, NF-kB-1 и др. [7]. Целью исследования было изучение содержания ядерного фактора транскрипции NF-kB и уровня цитокинов в сыворотке крови и ПЖ у пациенток репродуктивного возраста с наружным генитальным эндометриозом (НГЭ). Материалы и методы В исследовании приняли участие 52 пациентки с НГЭ и 20 женщин без НГЭ (группа контроля). Пациентки с НГЭ были разделены на 2 группы в зависимости от стадии заболевания. I группу составила 31 пациентка с I-II стадией НГЭ, II группу – 21 больная с III-IV стадией НГЭ. Критерии включения пациенток в исследование: проведение у больной эндоскопической операции (лапаро- и гистероскопия), подтверждающей НГЭ с последующей морфологической верификацией диагноза, у пациенток без НГЭ – с целью исключения трубного фактора бесплодия, стерилизации; репродуктивный возраст пациенток; наличие жалоб на бесплодие и/или болевой синдром; индекс массы тела 18,5-25 кг/м2. Критериями исключения из исследования служили пубертатный и перименопаузальный возрасты пациенток, а также наличие ожирения или метаболического синдрома. Забор сыворотки крови проводился рутинным способом до вводного наркоза, а ПЖ – во время лапароскопии при ревизии органов малого таза. Оценка степени распространения НГЭ осуществлялась согласно классификации r-AFS (пересмотра 1996 г.). При гистологическом исследовании фрагменты биоптатов тканей брюшины, яичников и эндометриоидных кист яичников окрашивались гематоксилином-эозином и пикрофуксином по Ван Гизону. Использован ИФА с программным обеспечением Victor (Финляндия) для TNFα, IL-8 с реактивами фирмы Bender MedSystems (Австрия), для IL-13, IL-18, IL-23 – Cloud-Clone Corp (США) согласно рекомендациям производителя. Ядерный фактор NF-kB исследовали в ПЖ наборами фирмы Ebioscience (США). Для формирования базы данных и проведения статистического исследования использовали пакеты прикладных программ («Мегастат» и Statistica 10,0). Для определения статистических различий между группами применялся критерий Манна–Уитни для независимых групп и критерий Вилкоксона для зависимых групп. Значение р < 0,05 считалось статистически значимым. Данные представлены в виде медианы и квартилей. При проведении корреляционного анализа данных применялся критерий Пирсона в случае нормального распределения переменных и критерий Спирмена в противном случае, при этом уровень значимости выбирался равным 0,05. Результаты и обсуждение Эндометриоидные кисты яичников были обнаружены у 24% (13/52) пациенток с НГЭ, а в 38% (20/52) случаев имело место сочетание эндометриоидных гетеротопий различных локализаций. Поверхностные очаги на яичниках имели место в 42% (20/52) случаев. Эндометриоидные гетеротопии на брюшине яичниковых ямок были обнаружены в 23% (12/52) случаев. Обнаруживались гетеротопии на брюшине Дугласова пространства – 22% (11/52), на задних листках широких связок матки – 48% (25/52), в зоне крестцово-маточных связок – в 64% (33/52) случаев. При изучении характера боли нами было отмечено, что у 35% (18/52) пациенток с НГЭ имели место жалобы на тазовые боли, при этом у 54% (11/21) пациенток с III-IV и только у 4% (1/31) женщин с I-II стадией НГЭ (р < 0,05). Дисменорея диагностирована у 20% (10/52) женщин с эндометриозом, причем в 29% (6/21) при тяжелых стадиях заболевания и в 5% (2/31) случаев при минимальных формах. Для оценки интенсивности болевого синдрома нами использовалась визуально-аналоговая шкала, согласно которой большинство пациенток характеризовали свой болевой синдром как интенсивный – от 7 до 9 баллов. Особая роль в развитии НГЭ принадлежит процессам, происходящим в перитонеальной полости и приводящим к развитию или регрессу эндометриоидного очага [2, 6]. Известно, что количество ПЖ у женщин с эндометриоидной болезнью значительно увеличено [2, 6]. В связи с тем, что в настоящее время все больше исследователей подчеркивают значение воспаления в эндометриоидных образованиях [1, 2, 3, 4], нами было проведено определение активности р65-субъединицы транскрипционного фактора NF-kB в ПЖ с целью выяснения возможной его роли в развитии данной патологии. В цитоплазме NF-kB существует в виде неактивного комплекса, состоящего из субъединиц р65/р50 гетеродимерного NF-kB и ингибирующего белка I-kB. После фосфорилирования специфическими киназами, т.н. IkB-киназами, ингибиторный белок подвергается дегидратации протеазами цитоплазмы. Индуцибельная активация NF-kB стимулирует транскрипцию индуцибельной NO-синтазы (iNOS), катализирующей синтез NO из L-аргинина. Полученные результаты показали, что ДНК-связывающая активность субъединицы р65 NF-kB в ПЖ женщин с I-II стадией НГЭ была статистически значимо выше, чем в контрольной и второй группе. Не было выявлено различий между показателями пациенток с III-IV стадией НГЭ и контрольной группой (табл. 1). Наши результаты согласуются с данными [7] о том, что нарушение сигнального пути NF-kB в ответ на аномальную продукцию цитокинов, вызывает дисрегуляцию иммунной системы, способствуя прогрессированию эндометриоза. ТАБЛИЦА 1. ПОКАЗАТЕЛИ ТРАНСКРИПЦИОННОГО ФАКТОРА NF-kB В ПЕРИТОНЕАЛЬНОЙ ЖИДКОСТИ ПАЦИЕНТОК ИССЛЕДУЕМЫХ ГРУПП TABLE 1. INDICATORS OF TRANSCRIPTION FACTOR NF-kB IN THE PERITONEAL FLUID OF PATIENTS IN THE STUDY GROUPS Показатели Indicators | I группа Group I | II группа Group II | Контроль Control | NF-kB р65 (о. е./мг белка) NF-κB p65 (optical units/mg of protein) | 7,70* # (2,00-15,10) | 7,0 (1,60-14,80) | 6,20 (0,34-40,60) | Примечание. * – статистически значимые различия с контрольной группой (р < 0,05); # – статистически значимые различия между I и II группой (р < 0,05). Note. *, statistically significant differences with the control group (p < 0.05); #, statistically significant differences between groups I and II (p < 0.05). Цитокины являются посредниками межклеточных взаимоотношений, регулирующими кроветворение и иммунный ответ. В ПЖ и сыворотке крови при НГЭ возрастают концентрации провоспалительных цитокинов, продуцируемых макрофагами [1, 2, 6, 9]. Особый интерес вызывает регуляция NF-kB, индуцируемая TNFα. TNFα способствует активации NF-kB и, следовательно, стимуляции клеточной пролиферации и развитию воспаления, а с другой – активирует каскад каспаз, что ведет к апоптозу клеток. Содержание TNFα в сыворотке крови у пациенток II группы статистически значимо отличалось от показателей контроля и группы пациенток с I-II стадией НГЭ соответственно в 1,8 и 1,5 раза, что свидетельствует о его роли в возникновении и закреплении эндометриоидных имплантатов. Известно, что провоспалительные цитокины являются стимулами в проявлении активности ядерного фактора, участвующего в регуляции многих генов путем разных комбинаций его субъединиц р50-р65, р50-с-rel и др. [6]. В ПЖ под влиянием эстрогенов стимулируется вызванная воздействием TNFα выработка IL-8, реализуемая с помощью внутриядерного фактора каппа-В (NF-kB). Уровень IL-8 в ПЖ при I-II стадии НГЭ оказался повышенным и отличался от значений у пациенток II группы и контроля в 4 и 7 раз соответственно (табл. 2). IL-8 является хемоаттрактантом для нейтрофилов, ангиогенным фактором и индуцирует пролиферацию клеток. Повышение уровня IL-8 на ранних стадиях заболевания предполагает участие данного цитокина в прогрессировании и распространении эндометриотических имплантатов в брюшной полости. ТАБЛИЦА 2. СОДЕРЖАНИЕ ЦИТОКИНОВ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ У ПАЦИЕНТОК ИССЛЕДУЕМЫХ ГРУПП TABLE 2. CYTOKINE CONTENT IN BLOOD SERUM IN PATIENTS OF THE STUDY GROUPS Показатели Indicators | I группа Group I | II группа Group II | Контроль Control | IL-18, пг/мл (сыворотка крови) IL-18, pg/mL (blood serum) | 33,7* (25,3-44,9) | 26,4 (18,9-32,3) | 19,7 (16,3-25,9) | IL-18, пг/мл (перитонеальная жидкость) IL-18, pg/mL (peritoneal fluid) | 76,9* # (50,3-85,6) | 55,4* (48,4-60,1) | 32,4 (22,3-40,9) | IL-13, пг/мл (сыворотка крови) IL-13, pg/mL (blood serum) | 7,95 (5,9-22,0) | 6,62 (4,44-13,30) | 6,1 (3,9-9,8) | IL-13, пг/мл (перитонеальная жидкость) IL-13, pg/mL (peritoneal fluid) | 5,5 (3,2-7,7) | 9,9* # (8,2-11,9) | 4,2 (3,5-6,9) | IL-23, пг/мл (сыворотка крови) IL-23, pg/mL (blood serum) | 0,46 (0,36-0,66) | 0,33 (0,12-0,66) | 0,66 (0,39-0,89) | IL-23, пг/мл (перитонеальная жидкость) IL-23, pg/mL (peritoneal fluid) | 0,48* (0,33-0,64) | 1,04* # (0,56-1,20) | 0,18 (0,14-0,22) | TNFα, пг/мл (сыворотка крови) TNFα, pg/mL (blood serum) | 10,3 (4,8-17,3) | 15,58* # (7,44-29,60) | 8,38 (6,42-17,20) | TNFα, пг/мл (перитонеальная жидкость) TNFα, pg/mL (peritoneal fluid) | 12,80 (8,89-20,80) | 11,740 (7,54-20,80) | 14,92 (8,14-18,40) | IL-8, пг/мл (сыворотка крови) IL-8, pg/mL (blood serum) | 13,7 (1,80-31) | 13,70 (5,80-15,70) | 14,70 (7,00-23,80) | IL-8, пг/мл (перитонеальная жидкость) IL-8, pg/mL (peritoneal fluid) | 58,6* # (19,80-67,80) | 14,455 (19,80-67,80) | 8,3 (4,5-18,8) | Примечание. * – статистически значимые различия с контрольной группой (р < 0,05); # – статистически значимые различия между I и II группой (р < 0,05). Note. *, statistically significant differences with the control group (p < 0.05); #, statistically significant differences between groups I and II (p < 0.05). IL-18 синтезируется моноцитами и макрофагами, увеличивает продукцию IFNγ и повышает активность NK-клеток, регулирует провоспалительные цитокины, действует как мощный ангиогенный фактор, индуцирующий миграцию эндотелиальных клеток, увеличивает выработку матриксных металлопротеиназ [3]. В группе пациенток с минимальными проявлениями эндометриоза по сравнению с женщинами в контрольной группе выявлено значительное повышение содержания IL-18 в сыворотке крови. Исследование содержания IL-18 в ПЖ показало статистически значимое его повышение у пациенток с различными стадиями заболевания по сравнению с группой контроля (р < 0,05) (табл. 2) . Наибольший уровень его обнаружен при эндометриозе I-II стадии, что свидетельствует о том, что IL-18 действует преимущественно как локальный иммуномодулятор, участвуя патогенезе эндометриоза. IL-13 является сигнальным белком адаптивной иммунной системы. Его источником являются Т-лимфоциты, вызывающие пролиферацию и дифференцировку В-лимфоцитов [4]. IL-13 ограничивает местное воспаление, приводит к удалению апоптотических клеток. У пациенток с поздними стадиями заболевания, по сравнению с женщинами в контрольной группе, а также больными с минимальными формами заболевания, отмечалось статистически значимое повышение IL-13 только в ПЖ при более поздних стадиях заболевания (табл. 2) . Наши результаты не противоречат данным [4] о роли IL-13 как ключевого регулятора воспалительных и иммунных реакций. IL-23 способствует развитию и дифференцировке T helper 17 (Th17), принимающих участие в генезе аутоиммунных процессов, обеспечивая сдвиг в сторону воспалительного профиля, способствуя развитию НГЭ. В сыворотке крови не получено статистически значимых отличий уровня IL-23 между группами, тогда как в ПЖ у пациенток с НГЭ отмечено повышение его уровня, наиболее выраженные изменения характерны для пациенток с III-IV стадией эндометриоза. Так, увеличение от контрольных показателей имело место в 5,8 раза (р < 0,05), а от показателей пациенток с I-II стадией заболевания – в 2,2 раза (р < 0,05) (табл. 2), что свидетельствует о том, что дисрегуляция IL-23 при эндометриозе связана с тяжестью заболевания . Выводы Наши исследования показывают роль про - и противовоспалительных цитокинов и транскрипционного фактора NF-kB на системном и локальном уровне в патогенезе НГЭ, а также создают предпосылки для дальнейших исследований по корреляции их уровней с тяжестью заболевания. About the authors N. V. Ermolova Rostov State Medical University Author for correspondence. Email: [email protected] PhD, MD (Medicine), Professor, Chief Researcher of the Department of Medical and Biological Problems in Obstetrics and Pediatrics, Professor of the Department of Obstetrics and Gynecology No. 1 Russian Federation, Rostov-on-DonI. I. Krukier Rostov State Medical University Email: [email protected] A. A. Grigoryants Stavropol State Medical University Email: [email protected] PhD (Medicine), Associate Professor, Department of Obstetrics and Gynecology Russian Federation, StavropolT. L. Botasheva Rostov State Medical University Email: [email protected] PhD, MD (Medicine), Professor, Chief Researcher of the Department of Medical and Biological Problems in Obstetrics and Pediatrics, Professor of the Department of Obstetrics and Gynecology No. 3 Russian Federation, Rostov-on-DonA. N. Chaika Rostov State Medical University Email: [email protected] Student Russian Federation, Rostov-on-DonА. R. Bineeva Rostov State Medical University Email: [email protected] Student Russian Federation, Rostov-on-DonA. M. Bondar Rostov State Medical University Email: [email protected] Student Russian Federation, Rostov-on-DonReferences - Аванесова Т.Г., Левкович М.А., Ермолова Н.В., Палиева Н.В., Петров Ю.А. Роль IL-8 и полиморфизма его гена в формировании НГЭ у пациенток репродуктивного возраста // Акушерство и гинекология, 2021. № 3. С. 124-129. [Avanesova T.G., Levkovich M.A., Ermolova N.V., Palieva N.V., Petrov Yu.A. The role of IL-8 and its gene polymorphism in the formation of EGE in patients of reproductive age. Akusherstvo i ginekologiya = Obstetrics and Gynecology, 2021, no. 3, pp. 124-129. (In Russ.)] - Адамян Л.В., Андреева Е.Н. Эндометриоз и его глобальное влияние на организм женщины // Проблемы репродукции, 2022. Т. 28, № 1. С. 54-64. [Adamyan L.V., Andreeva E.N. Endometriosis and its global impact on a woman’s body. Problemy reproduktsii = Problems of Reproduction, 2022, Vol. 28, no. 1, pp. 54-64. (In Russ.)] - Алиева А.М., Теплова Н.В., Лялина В.В., Шнахова Л.М., Аракелян Р.А., Скрипниченко Э.А., Валиев Р.К., Рахаев А.М., Шаваева М.Я., Никитин И.Г. Интерлейкин 18 и сердечно-сосудистые заболевания: обзор литературы // Российский медицинский журнал, 2022. Т. 28, № 3. C. 201-214. [Alieva A.M., Teplova N.V., Lyalina V.V., Shnakhova L.M., Arakelyan R.A., Skripnichenko E.A., Valiev R.K., Rakhaev A.M., Shavaeva M.Ya., Nikitin I.G. Interleukin 18 and cardiovascular diseases: a literature review. Rossiyskiy meditsinskiy zhurnal = Medical Journal of the Russian Federation, 2022, Vol. 28, no. 3, pp. 201-214. (In Russ.)] - Калинин Р.Е., Коноплева М.Г., Сучков И.А., Короткова Н.В., Мжаванадзе Н.Д. IL-13: связь с воспалением и цистеиновым протеолизом при варикозной трансформации сосудистой стенки // Казанский медицинский журнал, 2023. Т. 104, № 6. C. 896-906. [Kalinin R.E., Konopleva M.G., Suchkov I.A., Korotkova N.V., Mzhavanadze N.D. IL-13: relationship with inflammation and cysteine proteolysis in varicose transformation of the vascular wall. Kazanskiy meditsinskiy zhurnal = Kazan Medical Journal, 2023, Vol. 104, no. 6, pp. 896-906. (In Russ.)] - Щукина Н.А., Буянова С.Н., Бабунашвили Е.Л., Земскова Н.Ю., Глебов Т.А. Современные подходы к лечению эндометриоза (изучаем мировые и отечественные рекомендации) // Российский вестник акушера-гинеколога, 2022. Т. 22, № 2. С. 119-124. [Shchukina N.A., Buyanova S.N., Babunashvili E.L., Zemskova N. Yu., Glebov T.A. Modern approaches to the treatment of endometriosis (we study international and domestic recommendations). Rossiyskiy vestnik akushera-ginekologa = Russian Bulletin of Obstetrician-Gynecologist, 2022, Vol. 22, no. 2, pp. 119-124. (In Russ.)] - Ярмолинская М.И., Айламазян Э.К. Генитальный эндометриоз. Различные грани проблемы. СПб.: Эко-Вектор, 2017. 615 с. [Yarmolinskaya M.I., Ailamazyan E.K. Genital endometriosis. Various aspects of the problem]. St. Petersburg: Eco-Vector, 2017. 615 p. - Cacciottola L., Donnez J., Dolmans M.N. Can Endometriosis-Related Oxidative Stress Pave the Way for New Treatment Targets? Int. J. Mol. Sci., 2021, Vol. 22, no. 13, 7138. doi: 10.3390/itms 22137138. - Donnez J., Binda M.M., Donnez O., Dolmans M.M. Oxidative stress in the pelvic cavity and its role in the pathogenesis of endometriosis. Fertil. Steril., 2016, Vol. 106, no. 5, pp. 1011-1017. - Koninckx P.R., Ussia A., Adamyan L., Wattiez A., Gomel V., Martin, D. C.Pathogenesis of endometriosis: the genetic/epigenetic theory. Fertil. Steril., 2018, Vol. 111, no. 2, pp. 327-340. - Serasanambati M., Chilakapati S. Function of nuclear factor kappa B (NF-kB) in human diseases – A review. South Indian J. Biol. Sci., 2016, Vol. 2, no. 4, pp. 368-387.