Estudio y caracterización de células estromales uterinas procedentes de mujeres sanas y con endometriosis

Las propiedades inmunoreguladoras de las células mesenquimales estromales (MSC) hacen \nque la investigación sobre estas células sea un recurso prometedor para el tratamiento de \nenfermedades inflamatorias y autoinmunes. De ahí radica la necesidad de encontrar una fuente de \ncélulas con las propiedades de las MSC que sea fácil de obtener y que no implique métodos \ninvasivos. \nEn relación a ello, existen dos tipos celulares que se encuentran en tejidos adultos y cumplen \nestos requisitos, las células endometriales estromales (EnSC) y las células deciduales estromales \n(DSC). Las EnSC y las DSC presentan las características propias de las células progenitoras, \ntales como la clonogenicidad, la autorenovación y la capacidad de diferenciación a distintos linajes \nde origen mesenquimal. Además, se encuentran en una localización perivascular en el endometrio \nno gestante (EnSC) y en la decidua (DSC). Ambos tipos de células son capaces de decidualizarse \nen respuesta a la acción conjunta de las hormonas ováricas o placentarias (progesterona y \nestradiol) y otros factores endocrinos. Este proceso de diferenciación morfológica y bioquímica \ninducido durante la fase secretora del ciclo tiene la finalidad de preparar al endometrio para la \nimplantación del embrión. Si hay embarazo, el proceso de decidualización se mantiene hasta \ncompletarse. En este contexto, el éxito del embarazo depende de la modulación inmunológica y la \ninducción de tolerancia materno-fetal por parte de las DSC. Estas propiedades inmunoreguladoras \ndeterminan que las DSC y sus antecesores en el endometrio, las EnSC, puedan ser utilizadas en \nel tratamiento de enfermedades inflamatorias y autoinmunes. \nPor otra parte, el estudio y caracterización de las células estromales uterinas en condiciones \npatológicas es necesario para poder entender mejor la patogenia de enfermedades ginecológicas, \ncomo la endometriosis. Esta patología se caracteriza por la presencia de tejido endometrial fuera \nde la cavidad uterina, en localizaciones ectópicas. Las células endometriósicas estromales \n(eEnSC) se caracterizan por la resistencia a la progesterona, la baja sensibilidad a la apoptosis y \npor establecer una comunicación intercelular con el sistema inmunitario que evita que este pueda \neliminar el tejido endometrial ectópico. \nEn base a ello, el objetivo general de esta investigación es estudiar el origen, la diferenciación y \nlas derivaciones patológicas de las células estromales uterinas. Por esta razón, hemos analizado \nlas características fenotípicas y funcionales de las células estromales uterinas humanas \nprocedentes del endometrio no gestante, de la decidua y del endometrioma ovárico, y su \ncomparación con las MSC. \nNuestros resultados muestran que las células precursoras de las EnSC (preEnSC) y de las \nDSC (preDSC) tienen un fenotipo antigénico similar y compatible con el de MSC de médula ósea. \nTambién hemos comprobado, en el caso de las preDSC, la capacidad de diferenciación a células \nde tres linajes mesenquimales, la expresión de marcadores de células madre y la clonogenicidad. \nEstos datos apoyan la hipótesis de que las MSC de médula ósea son la fuente o el origen de las \nEnSC y las DSC. Además, hemos demostrado que las preDSC expresan antígenos propios de \npericitos, factores angiogénicos, presentan actividad contráctil y una localización in vivo alrededor \nde los vasos sanguíneos; todas ellas son características propias de pericitos, que son células \nestrechamente relacionadas o idénticas a las MSC. Estos resultados nos indican que las preDSC \nconstituyen el nicho perivascular de las MSC en la decidua humana. Aunque las preEnSC y las preDSC son el mismo tipo celular, se encuentran en dos contextos \nfisiológicos diferentes; por lo que, según nuestros resultados, comparten el mismo fenotipo \nantigénico y funciones. Sin embargo, hemos demostrado que las preDSC tienen una mayor \ncapacidad de decidualización que las preEnSC, evidenciada por las funciones asociadas a este \nproceso de diferenciación: secreción de prolactina (PRL) e IL-15, inducción de apoptosis y cambio \na una morfología redondeada. Estas diferencias son atribuibles a los distintos ambientes \nfisiológicos en los que se encuentran, es decir, no gestación y gestación. \nLa decidualización de las preDSC cambia algunas de sus características, tales como la \nlocalización perivascular (que pasa a ser extravascular), el descenso de la expresión de antígenos \nasociados a pericitos, la menor contractilidad celular y el desarrollo de un perfil más \ninmunoregulador que contribuye a la tolerancia inmunológica materno-fetal. Concretamente, \nhemos estudiado la actividad quimiotáctica de las DSC sobre linfocitos T activados, los cuales \npodrían tener una actividad proabortígena al llegar a la decidua. Hemos demostrado que en las \nDSC decidualizadas (dDSC) se inhibe la secreción de CXCL9, CXCL10 y CXCL11, quimioquinas \ncon capacidad de atraer a células Th1 y Tc. Además, las dDSC producen un factor termoestable y \nde bajo peso molecular que inhibe activamente la migración de células T activadas. También \nhemos observado que las dDSC inhiben la expresión de TNF-α e IFN-γ en las células T activadas \nquimioatraídas. Todos estos mecanismos evitan la llegada de linfocitos T con actividad \nproabortígena a la decidua. \nEn el contexto patológico de la endometriosis, hemos comprobado que las eEnSC son \nresistentes a la decidualización, ya que conservan en su mayoría la morfología fibroblástica, \napenas producen PRL y no sufren apoptosis. Sin embargo, las preeEnSC secretan más CXCL9 \nque las preEnSC y, paralelamente, presentan una mayor actividad quimiotáctica sobre linfocitos T \ny células NK activadas. Nuestros datos sugieren que estas células inmunitarias, atraídas por las \npreeEnSC, pueden estar implicadas en la patogenia de la endometriosis.