Regulación hormonal de la expresión de miRNAs en cultivos primarios de pacientes con endometriosis y mujeres control.

[ES] La endometriosis es una enfermedad ginecológica benigna, inflamatoria y dependiente de estrógenos que afecta al 6-10% de mujeres en edad reproductiva. Se trata de una enfermedad altamente invalidante caracterizada por la presencia de dolor en distintas circunstancias e infertilidad, afectando notablemente a la calidad de vida de las pacientes. Los estrógenos juegan un papel fundamental en su fisiopatología ya que promueven el crecimiento y la invasión de la lesión endometrial. Los microRNAs (pequeñas moléculas de RNA no codificantes) regulan la expresión génica a nivel post- transcripcional. Hay evidencia de que la desregulación en la expresión de ciertos miRNAs está involucrada en la fisiopatología la endometriosis. No obstante, existen pocos trabajos acerca de la influencia de los estrógenos en la regulación de los miRNAs en esta patología, por lo que el objetivo principal del presente trabajo ha sido estudiar dicha influencia. Para ello, se han empleado cinco cultivos primarios de células estromales de endometrio de mujeres con y sin endometriosis y de lesiones endometriósicas, y una línea celular epitelial ya establecida. Tras la caracterización morfológica de las células de estudio, se ha determinado la presencia de ESR1 en todos los cultivos celulares, así como la viabilidad de la técnica de TRIzol para el aislamiento del RNA total sin sesgar la extracción de los miRNAs de interés (miR-99a-5p, let-7c-5p, miR-143-3p, miR-424-5p y miR-29c-3p). Además, mediante análisis bioestadísticos se ha establecido let-7c como normalizador frente a U6 snRNA. Finalmente, se ha observado que, tras el tratamiento con estradiol a dosis 10-9 M, los miR-424-5p y miR- 29c-3p aumentan en la línea celular epitelial Ishikawa y el miR-143-3p aumenta en los cultivos de células estromales procedentes de endometrio control y eutópico.