Strategies for the production of soluble human alphainterferons in Escherichia coli: expression, purification, and characterization

Strategies for manufacturing soluble human alphainterferons in Escherichia coli: expression, purification, and testing. | SciELO Preprints window.dataLayer = window.dataLayer || []; function gtag(){dataLayer.push(arguments);} gtag('js', new Date()); gtag('config', 'G-3TT8HYRH0Y'); Open Menu Registrar-se Acesso English Español Ir para o conteúdo principal Ir para o menu de navegação principal Ir para o rodapé Preprints Submissão Áreas do Conhecimento Ciências Agrárias Ciências Biológicas Ciências da Saúde Ciências Exatas e da Terra Ciências Humanas Ciências Sociais Aplicadas Engenharias Linguística, letras e artes Educação em Revista Memórias do Instituto Oswaldo Cruz 47º Encontro Anual da ANPOCS 48º Encontro Anual da ANPOCS 49º Encontro Anual da ANPOCS Sobre Sobre o Servidor Declaração de Privacidade Atualizações do Sistema Contato FAQ Ética no SciELO Preprints Avaliação de preprints Anotações em preprints (via Hypothesis) Avalie um preprint Notícias Início / Ciências Biológicas O preprint foi publicado em outro meio. DOI do preprint publicado https://doi.org/10.1016/j.pep.2026.106901 Preprint / Versão 3 Strategies for manufacturing soluble human alphainterferons in Escherichia coli: expression, purification, and testing. article.authors6a0c1cd5c39ba Rodrigo Martins Bretas Universidade Federal de Minas Gerais image/svg+xml https://orcid.org/0009-0002-0863-3358 Sophie Yvette Leclercq Ezequiel Dias Foundation image/svg+xml Luciana Maria Silva Lopes Ezequiel Dias Foundation image/svg+xml Armando da Silva Cunha Jr Universidade Federal de Minas Gerais image/svg+xml DOI: https://doi.org/10.1590/SciELOPreprints.11736 Palavras-chave: recombinant, alphainterferon, bioprocess, soluble expression Resumo Escherichia coli has been the favorite expression host for the last decades when it comes to simple recombinant proteins used as biopharmaceuticals. This organism is well-characterized and capable of synthesizing enormous amounts of heterologous polypeptides, especially when no complex post-translational modifications are involved, such as the case of alphainterferons, which are small cytokines used against viral infections and tumors. A significant drawback of this bacterial system is that target molecules are commonly obtained as insoluble and inactive inclusion bodies in the cytoplasm, raising the need for laborious and expensive steps of solubilization and renaturation before the product can be purified. Here, we review past experiences and advances that have delivered IFN-α in its soluble and functional form, including optimization of culture conditions and induction, the use of engineered strains, fusion partners that enhance solubility, and translocation to the periplasm, among others. Also, we assessed downstream processing and analytical techniques that ensured the product’s purity and quality. Finally, we identified some gaps that may represent future opportunities to improve soluble yields. Downloads Os dados de download ainda não estão disponíveis. Biografia do Autor Rodrigo Martins Bretas, Universidade Federal de Minas Gerais Farmacêutico pela UFRJ, Especialista em Regulação e Vigilância Sanitária da Anvisa desde 2005, tendo atuado os primeiros 7 anos com registro de produtos biológicos, e, desde então, com inspeção de Boas Práticas de Fabricação de medicamentos, insumos farmacêuticos ativos e produtos biológicos. Mestre em Tecnologia de Imunobiológicos por Bio-Manguinhos/Fiocruz. Atualmente (2022-2026) é doutorando em Ciências Farmacêuticas na UFMG, e este artigo de revisão é parte da pesquisa. PDF (Inglês) Postado 17/04/2025 — Atualizado em 02/01/2026 Versões 02/01/2026 (3) 26/09/2025 (2) 17/04/2025 (1) Como Citar Strategies for manufacturing soluble human alphainterferons in Escherichia coli: expression, purification, and testing. (2026). Em SciELO Preprints . https://doi.org/10.1590/SciELOPreprints.11736 (Original work published 2025) Formatos de Citação ACM ACS APA ABNT Chicago Harvard IEEE MLA Turabian Vancouver Baixar Citação Endnote/Zotero/Mendeley (RIS) BibTeX Série Ciências Biológicas Copyright (c) 2025 Rodrigo Martins Bretas, Sophie Yvette Leclercq, Luciana Maria Silva Lopes, Armando da Silva Cunha Jr Este trabalho está licenciado sob uma licença Creative Commons Attribution 4.0 International License . .citations-container { overflow-y: auto; overflow-x: hidden; max-height: 1000px; } Plaudit Justificativa da versão Versão 3 do artigo de revisão contemplando as melhorias sugeridas pelos revisores da revista científica Protein Expression and Purification. Basicamente, houve correções quanto às referências bibliográficas e avanços na seção sobre oportunidades adicionais para explorar a biossíntese de interferon solúvel pela bactéria E. coli. function insertAfter(newNode, referenceNode) { referenceNode.parentNode.insertBefore(newNode, referenceNode.nextSibling); } const publishedBlock = document.getElementsByClassName("item published")[0]; const justificationBlock = document.getElementsByClassName('item versionJustification')[0]; insertAfter(justificationBlock, publishedBlock); Declaração de dados Os dados de pesquisa estão contidos no próprio manuscrito Aviso de preprints Preprints são manuscritos não avaliados por um periódico científico ou já avaliados mas em processo de publicação. .block_announcements_article:not(:last-child) { padding-bottom: 1.5em; border-bottom: 1px solid; } .block_announcements_article { text-align: left; } .block_announcements #show-all{ font-style: italic; } Notícias SciELO Preprints adota obrigatoriedade de declaração de disponibilização de dados de pesquisa 19 agosto 2025 A partir de 1º de setembro de 2025 os manuscritos submetidos ao SciELO Preprints devem incluir uma declaração de disponibilidade de dados informando sobre onde e como os dados da pesquisa que deram origem ao artigo podem ser acessados. Atualização da Política Editorial e FAQ 21 maio 2025 Todos(as) os(as) autores(as) são solicitados(as) a consultarem a nossa Política Editorial e nossas FAQs antes de submeterem o seu manuscrito. Prêmio Ben Barres Spotlight: Inscrições abertas para 2024 20 maio 2024 Prêmios de até US$ 5.000 estão agora disponíveis para pesquisadores de origens sub-representadas ou países com financiamento limitado para apoiar sua pesquisa, carreira e comunidade. Preprints do SciELO Preprints nas ciências da vida ou biomédicas com pelo menos uma revisão disponível no Sciety são elegíveis! Show all announcements ... SciELO - Scientific Electronic Library Online Rua Dr. Diogo de Faria, 1087 – 9º andar – Vila Clementino 04037-003 São Paulo/SP - Brasil E-mail: [email protected] app = {"hypothesisHandlerUrl":"https:\/\/preprints.scielo.org\/index.php\/scielo\/$$$call$$$\/plugins\/generic\/hypothesis\/controllers\/hypothesis\/"}; var pkpUsageStats = pkpUsageStats || {};pkpUsageStats.data = pkpUsageStats.data || {};pkpUsageStats.data.Submission = pkpUsageStats.data.Submission || {};pkpUsageStats.data.Submission[11736] = {"data":{"2025":{"4":"18","5":"19","6":"13","7":"18","8":"11","9":"29","10":"80","11":"63","12":"58"},"2026":{"1":"59","2":"28","3":"39","4":"67","5":"33"}},"label":"Todos os downloads","color":"79,181,217","total":535}; var pkpUsageStats = pkpUsageStats || {};pkpUsageStats.locale = pkpUsageStats.locale || {};pkpUsageStats.locale.months = ["Jan","Fev","Mar","Abr","Mai","Jun","Jul","Ago","Set","Out","Nov","Dez"];pkpUsageStats.config = pkpUsageStats.config || {};pkpUsageStats.config.chartType = "bar"; (function (w, d, s, l, i) { w[l] = w[l] || []; var f = d.getElementsByTagName(s)[0], j = d.createElement(s), dl = l != 'dataLayer' ? 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