Resveratrol como fitoterapia propuesta en endometriosis

Madanes, Daniela. "Resveratrol como fitoterapia propuesta en endometriosis" . (2022). Tesis Doctoral, Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. | Documento: | Tesis Doctoral | | Título: | Resveratrol como fitoterapia propuesta en endometriosis | | Título alternativo: | Resveratrol as a proposed phytotherapy in endometriosis | | Autor: | Madanes, Daniela | | Editor: | Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales | | Lugar de trabajo: | Fundación del Instituto de Biología y Medicina Experimental - CONICET. Instituto de Biología y Medicina Experimental (IBYME) | | Publicación en la Web: | 2022-11-29 | | Fecha de defensa: | 2022-04-08 | | Fecha en portada: | Marzo 2022 | | Grado Obtenido: | Doctorado | | Título Obtenido: | Doctor de la Universidad de Buenos Aires en el área de Química Biológica | | Departamento Docente: | Departamento de Química Biológica | | Director: | Ricci, Analía Gabriela | | Director Asistente: | Barañao, Rosa Inés | | Consejero: | Calvo, Juan Carlos | | Jurado: | Parborell, María Fernanda Agustina; Motta, Alicia Beatriz; Etchepareborda, Juan José | | Idioma: | Español | | Palabras clave: | ENDOMETRIOSIS; RESVERATROL ; VIABILIDAD CELULAR; APOPTOSIS; EXPRESION GENICA ; CELULAS MADRE; OVARIOENDOMETRIOSIS; RESVERATROL; CELL VIABILITY ; APOPTOSIS ; GENE EXPRESSION; STEM CELLS; OVARY | | Formato: | | | Handle: | https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n7162_Madanes | | PDF: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/tesis/tesis_n7162_Madanes.pdf | | Registro: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/collection/tesis/document/tesis_n7162_Madanes | | Ubicación: | QUI 007162 | | Derechos de Acceso: | Esta obra puede ser leída, grabada y utilizada con fines de estudio, investigación y docencia. Es necesario el reconocimiento de autoría mediante la cita correspondiente. Madanes, Daniela. (2022). Resveratrol como fitoterapia propuesta en endometriosis. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales). Recuperado de https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n7162_Madanes | La endometriosis (EDT) es una de las enfermedades ginecológicas más frecuentes en mujeres en edad reproductiva. Se trata de una patología benigna, estrógeno dependiente, que se caracteriza por la presencia de tejido endometrial fuera de la cavidad uterina. Los principales síntomas son el dolor pélvico y la infertilidad. Las terapias médicas disponibles en la actualidad son insuficientes debido a las numerosas recidivas y los efectos adversos que generan. Resulta indispensable la búsqueda de tratamientos alternativos que inhiban los mecanismos involucrados en el desarrollo de la enfermedad, que puedan ser administrados por periodos prolongados sin interferir con la posibilidad de lograr un embarazo, que protejan la fertilidad y que resulten inocuos. Dado que los compuestos naturales cumplen con estas condiciones, hace algunos años que en nuestro grupo orientamos la búsqueda de terapéuticas hacia este tipo de compuestos, entre ellos, el resveratrol. Se trata de un polifenol presente en las uvas y sus derivados como el vino, frutos rojos y maníes, que ha demostrado tener potencial anticancerígeno. Estudios realizados en nuestro laboratorio comprobaron sus efectos inhibitorios sobre el desarrollo de la EDT experimental. Estos resultados nos alentaron a profundizar en la investigación de este compuesto y, para ello, nos propusimos dos objetivos específicos: estudiar los mecanismos a través de los cuales el resveratrol interfiere con el avance de esta patología utilizando distintos modelos in vitro y evaluar los efectos de un tratamiento oral prolongado, tal como el que requieren las pacientes, en un modelo murino de EDT, sobre el desarrollo de la enfermedad y sobre el ovario. En esta tesis demostramos que el resveratrol tiene efecto inhibitorio sobre la viabilidad celular y promueve la apoptosis en una línea celular proveniente del epitelio de una lesión endometriósica (12Z) y en una línea celular de estroma endometrial humano (St-T1b), modificando los niveles de expresión y cambios post traduccionales de proteínas involucradas en el proceso. Sobre las líneas celulares y sobre cultivos primarios de células estromales endometriósicas derivadas de tejido ectópico de pacientes con EDT, comprobamos que la fitoalexina regula la expresión de genes involucrados en la migración celular llevando a la inhibición de dicho proceso. Asimismo, observamos que el compuesto modula ciertos parámetros angiogénicos. Por otro lado, encontramos que el resveratrol aumentó los niveles de expresión génica de marcadores de pluripotencia en las líneas celulares 12Z y St-T1b y en los cultivos primarios mencionados previamente. Este trabajo constituye el primer reporte que demuestra en células endometriósicas la capacidad de la fitoalexina de mantener estable a las células pluripotentes evitando su proliferación e, incluso, tal como se plantea en bibliografía sería capaz de conducir a las células a un estado de estrés metabólico que promueve la muerte celular. Asimismo, conociendo el papel clave de los estrógenos en el desarrollo de la EDT, resultó alentadora la disminución ejercida por el resveratrol sobre los niveles de expresión proteica del receptor de estrógenos α (REα) y de la enzima aromatasa P450, sobre una línea celular epitelial de adenocarcinoma endometrial humano (ECC-1) y una línea celular de estroma endometrial humano (T-HESC). En el modelo in vivo de EDT experimental observamos que el resveratrol, redujo el número de lesiones endometriósicas desarrolladas, promovió la infiltración y la involución epitelial de las lesiones e indujo la apoptosis, tanto en las células epiteliales, como en las células estromales que conforman las lesiones. Asimismo, observamos que el compuesto provocó un aumento significativo en la cantidad de folículos primordiales y una disminución significativa en la cantidad de folículos atrésicos en el ovario. Estos resultados sugieren que la fitoalexina podría estar ejerciendo un efecto inhibitorio sobre el desarrollo de las lesiones endometriósicas, a la vez que protege al ovario. Estos resultados, en conjunto con nuestros trabajos previos, avalan el estudio del resveratrol como una estrategia novedosa para tratar la EDT, que debe continuar profundizándose. Endometriosis (EDT) is one of the most common gynecological diseases in women of reproductive age. It is a benign, estrogen-dependent pathology, characterized by the presence of endometrial tissue outside the uterine cavity. The main symptoms are pelvic pain and infertility. Medical therapies available to date are unsatisfactory due to their adverse effects and the frequent pathology recurrences. It is essential to search for alternative treatments that inhibit the mechanisms involved in the development of the disease, can be administered for prolonged periods without interfering with the possibility of achieving pregnancy, protect fertility and have no adverse effects. Given that natural compounds meet these conditions, for some years now our group has been searching for therapeutics towards this type of compound, including resveratrol. This is a polyphenol present in grapes and their derivatives such as wine, red fruits and peanuts, which has been shown to have anticarcinogenic potential. In previous studies we have shown its inhibitory effects on the development of experimental EDT. These results encouraged us to deepen our research on this compound and, for this purpose, we propose two specific objectives: to study the mechanisms through which resveratrol interferes with the progression of this pathology using different in vitro models and to evaluate the effects of a long-term oral treatment, such as that required by patients, in a murine model of EDT, on the development of the disease and on the ovary. In this thesis we demonstrate that resveratrol has an inhibitory effect on cell viability and promotes apoptosis in a cell line derived from the epithelium of an endometriotic lesion (12Z) and in a human endometrial stromal cell line (St-T1b), modifying the expression levels and post-translational changes of proteins involved in the process. On cell lines and on primary cultures of endometriotic stromal cells derived from ectopic tissue of patients with ESD, we found that phytoalexin regulates the expression of genes involved in cell migration leading to the inhibition of this process. We also observed that the compound modulates certain angiogenic parameters. On the other hand, we found that resveratrol increased the gene expression of the pluripotency markers in the 12Z and St-T1b cell lines and in the primary cultures. This work constitutes the first report that demonstrates the capacity of phytoalexin to maintain pluripotent cells stable in endometriotic cells, preventing their proliferation and, as suggested in the literature, it may even be able to lead the cells to suffer a metabolic stress that promotes cell death. Likewise, knowing the key role of estrogens in the development of EDT, the decrease exerted by resveratrol on the protein expression levels of estrogen receptor α and aromatase P450 enzyme on a human endometrial adenocarcinoma epithelial cell line (ECC-1) and a human endometrial stromal cell line (T-HESC) was encouraging. In the in vivo model of experimental EDT, we observed that resveratrol reduced the number of endometriotic lesions developed, promoted infiltration and epithelial involution of the lesions and induced apoptosis in both epithelial cells and stromal cells that form the lesions. We also observed that the compound caused a significant increase in the number of primordial follicles and a significant decrease in the number of atretic follicles in the ovary. These results suggest that phytoalexin could be exerting an inhibitory effect on the development of endometriotic lesions while protecting the ovary. These results, taken together with our previously published ones, encourage us to investigate these compounds as novel strategies to treat endometriosis that should continue to be deepened. Madanes, Daniela. (2022). Resveratrol como fitoterapia propuesta en endometriosis. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n7162_Madanes Madanes, Daniela. "Resveratrol como fitoterapia propuesta en endometriosis". Tesis Doctoral, Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, 2022.https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n7162_Madanes Descargas totales desde : https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/tesis/tesis_n7162_Madanes.pdf