Identificación, caracterización y aislamiento de células madre somáticas del endometrio murino y humano.

RESUMEN El presente trabajo de investigacion tiene como objetivo la identificacion de celulas madre somaticas en el endometrio murino y humano. En la mayoria de los tejidos de individuos adultos, existen pequenas poblaciones de celulas indiferenciadas que poseen la capacidad de diferenciarse a tipos celulares maduros, dividiendose a su vez para mantener el balance necesario de celulas progenitoras indiferenciadas. Estas celulas reciben el nombre de celulas madre somaticas y se caracterizan por ser celulas indiferenciadas presentes en tejidos u organos diferenciados; siendo ademas las encargadas del mantenimiento, regeneracion y renovacion celular en el lugar donde residen. Por otro lado, el endometrio es un tejido altamente dinamico con capacidad regenerativa y proliferadora, renovandose mensualmente de novo y asi sucesivamente durante cada ciclo menstrual y durante toda la vida reproductiva de la mujer. En este contexto, la hipotesis de partida de este trabajo ha sido que en el endometrio murino y humano debe de existir una poblacion de celulas madre somaticas responsables de su alta capacidad regenerativa. Este trabajo se ha desarrollado basandose en dos modelos: el murino y el humano. Se elaboro un modelo animal mediante el cual se demuestra la existencia de celulas madre somaticas en el endometrio del raton. A los ratones neonatos (3 dias de edad) se les admministro 5-Bromo-2-desoxiuridina (BrdU), tras esto los animales fueron sacrificados en diferentes momentos de su vida, entre ellos dia 7 (control de la tecnica), dia 14 (momento del destete), dia 21 (madurez sexual) y dias 49 en adelante (vida adulta). La localizacion de las celulas que retuvieron el marcaje se realizo mediante inmunohistoquimica y ademas las celulas que presentaron tincion se co-localizaron con marcadores tipicos de celulas madre como Oct-4 (marcador de celulas madre embrionarias) y c-Kit (marcador de celulas madre hematopoyeticas). Los estudios murinos permitieron concluir tanto a nivel proteico como molecular la existencia de una poblacion de celulas madre somaticas en el endometrio del raton, encontrandose estas localizadas en la region basal del estroma endometrial. Del mismo modo, en el estudio se realizo el analisis de muestras endometriales humanas para determinar la existencia y presencia de celulas madre somaticas en este tejido. La tecnica de deteccion de esta poblacion celular se realizo mediante el metodo del Hoescht y la identificacion de la Side Population (SP) por citometria de flujo con capacidad de separacion celular. Esta tecnica permitio aislar la poblacion SP desde el endometrio humano correspondiente a las fracciones epiteliales y estromales de este tejido. Dicha poblacion fue caracterizada a nivel molecular y presento marcadores de indiferenciacion tipicos tal como Oct-4 y c-Kit. Ademas las celulas SP aisladas presentaron actividad telomerasa, actividad tipica de celulas inmortales e indiferenciadas. El porcentaje de celulas SP en el endometrio humano permanecio constante en los rangos de edades estudiadas, sugiriendo asi que esta poblacion permaneceria estable a lo largo de la vida de la mujer. Ela analisis fenotipico determino el posible origen mesenquimal de las celulas aisladas ya que presentaron el marcador de celulas mesenquimales CD90. Estos avances en la identificacion y caracterizacion de celulas madre somaticas en el endometrio humano y murino ofrecen un nuevo punto de vista para el estudio de la endometriosis y el cancer de endometrio; ya que es posible que las celulas madre somaticas endometriales jueguen un papel fundamental en la fisiopatologia de determinadas enfermedades ginecologicas como las anteriormente citadas. __________________________________________________________________________________________________