Die Rolle der Calcium-bindenden Proteine in der Endometriose-assoziierten Innervation

Jüngste Studien haben die Beteiligung von Nervenfasern (NF) und Neurotrophinen in der Pathogenese der Endometriose (EM) gezeigt. Die Beteiligung Calcium- bindender Proteine (CaBP) an entzündlichen Prozessen ist bereits bekannt. Das Ziel dieser Arbeit lag in der Charakterisierung von Nervenfasern (NF) in den läsionsnahen und peripheren (EM-freien) Anteilen peritonealer (pEL) und rectovaginaler (rEM) EM und dem Nachweis der CaBP in NF der pEL und rEM sowie den Peritonealflüssigkeiten (PF) von EM-Patientinnen, um die Rolle der CaBP in der Endometriose-assoziierten Innervation und der Schmerzpathogenese der EM zu analysieren. Es erfolgte der Nachweis von PGP 9.5 (Marker intakter NF) und GAP43 (neuronaler Wachstumsmarker) sowie der CaBP S100B, Calbindin, Calretinin, Calmodulin, Parvalbumin in NF der läsionsnahen und peripheren Anteile der pEL (n=20), des gesunden Peritoneums von Patientinnen ohne EM (n=10) sowie in den Schichten der rEM (n=20), gesunden Darms und gesunder Vagina von Patientinnen ohne EM (n=7). Mittels Western-Blot-Analyse erfolgte der Nachweis CaBP in PF von Patientinnen mit (n=33) und ohne (n=11) EM und in neuronalen PC12-Zellen, die in PF von EM-Patientinnen (n=30) inkubiert wurden. Ein neuronaler Wachstums-Assay und Immunfluoreszenz sensibler Hinterwurzelganglien (DRG) zum Nachweis CaBP wurde ebenfalls durchgeführt. In den peripheren Anteilen der pEL ergab sich im Vergleich zu den läsionsnahen Anteilen sowie zum gesunden Peritoneum eine signifikant niedrigere Dichte intakter NF. Im Verhältnis zeigte sich jedoch eine größtenteils signifikant höhere Dichte S100B-, Calbindin-, Calretinin-, Calmodulin- und Parvalbumin- positiver NF in der pEL und auch der rEM. Hinsichtlich der Schmerzintensität ergab sich für Calbindin in der pEL eine erhöhte NF-Dichte für Patientinnen mit leichter Schmerzintensität sowie eine signifikant erniedrigte Calmodulin- positive NF-Dichte für Patientinnen mit starker Schmerzintensität. GAP43 ließ sich in NF der pEL signifikant erhöht nachweisen. S100B, Calbindin und Calretinin konnten gleichermaßen in PF von Patientinnen mit und ohne EM nachgewiesen werden. Für S100B und Calretinin ergab sich hinsichtlich der Schmerzintensität eine signifikant erhöhte Expression in PF von EM- Patientinnen mit leichten Schmerzen. In PC12-Zellen, die in PF von EM- Patientinnen inkubiert wurden, ließen sich eine erniedrigte Calretinin- Expression sowie eine erhöhte Expression von Calbindin, mit höchster Ausprägung im Rahmen leichter Schmerzintensität im Vergleich zur Kontrollgruppe nachweisen. In PF von EM-Patientinnen inkubierte DRG zeigten ein stärkeres Neuritenwachstum und CaBP-Expression als DRG, die in PF von Patientinnen ohne EM inkubiert wurden. CaBP werden in Endometriose- assoziierten Nervenfasern verstärkt exprimiert. Ebenso scheinen Peritonealflüssigkeiten von EM-Patientinnen Einfluss auf die Expression von CaBP in neuronalem Gewebe zu nehmen. Basierend auf diesen Ergebnissen scheint eine Rolle der CaBP in den chronisch entzündlichen Prozessen und der Schmerzpathogenese der EM möglich.