Identificación de biomarcadores no invasivos de endometriosis mediante metabolómica por RMN

La endometriosis es una enfermedad ginecologica cronica, estrogeno dependiente, asociada a dolor pelvico e infertilidad. Se define por la presencia de tejido endometrial fuera de la cavidad uterina y representa uno de los desordenes ginecologicos benignos mas comunes. Los sintomas de la endometriosis son altamente variables, inespecificos y comunes en la poblacion general, lo que contribuye a un retraso en el diagnostico que oscila entre 8-12 anos. Actualmente, el “patron de oro” para el diagnostico de la endometriosis es la cirugia, normalmente mediante laparoscopia. Sin embargo, se trata de un procedimiento invasivo, que implica riesgos potenciales y no es apropiado para el seguimiento periodico de la enfermedad una vez iniciado el tratamiento. Ademas, las tecnicas de imagen (ecografia transvaginal, resonancia magnetica) y los analisis de sangre tienen un valor limitado como herramienta diagnostica. En los ultimos anos, se han llevado a cabo numerosos estudios con el objetivo de encontrar un metodo de diagnostico eficaz y no invasivo de la endometriosis. Sin embargo, la mayoria de las aproximaciones y biomarcadores propuestos no poseen capacidad diagnostica suficiente para ser trasladados a la practica clinica y ademas, muchos de ellos continuan siendo parcialmente invasivos. Un marcador, o una combinacion de marcadores, que pudiese/n medirse en sangre y/u orina seria la forma mas eficiente para el diagnostico de esta patologia. En este contexto, la aplicacion de tecnicas metabolomicas, que permiten la caracterizacion de los perfiles metabolicos y un analisis exhaustivo de las rutas bioquimicas implicadas en el inicio y progresion de las enfermedades, representa una estrategia sumamente util. Particularmente, la metabolomica por espectroscopia de Resonancia Magnetica Nuclear (eRMN) se trata de una plataforma robusta que permite la medida y cuantificacion de un amplio rango de metabolitos. La eRMN es una tecnica potente, no invasiva y no destructiva que puede utilizarse para identificar y cuantificar una gran cantidad de componentes metabolicos en una gran variedad de muestras biologicas. Este trabajo, por tanto, pretende sentar las bases que permitan evaluar la eficacia de la eRMN para la identificacion de biomarcadores de endometriosis. Para llevar a cabo este estudio (casos/controles) se seleccionaron un conjunto de mujeres sanas y pacientes de endometriosis que, previo consentimiento informado, cumplian los criterios de inclusion/exclusion definidos para este estudio. Se ha recogido y procesado muestras plasma, orina y tejido de cada uno de las mujeres incluidas en el estudio, siguiendo los protocolos recomendados para garantizar la estabilidad y conservacion de las muestras. El analisis metabolomico se ha llevado a cabo utilizando espectrometros de RMN de alta resolucion. Desde el punto de vista metodologico, la comparacion de los perfiles metabolomicos de las pacientes con endometriosis respecto a las mujeres sanas incluyo las siguientes fases: adquisicion de los experimentos de RMN, pre-procesado de los espectros y preparacion de los datos, asignacion de los espectros, analisis estadistico de los perfiles metabolomicos, identificacion y cuantificacion de los metabolitos e interpretacion biologica de las alteraciones metabolicas identificadas. El estudio de los perfiles metabolicos mediante RMN proporciona una vision global de las alteraciones metabolicas asociadas a la endometriosis. La caracterizacion de los perfiles de orina y plasma, empleando una estrategia no dirigida, ha permitido la identificacion de un conjunto de metabolitos cuyos niveles difieren significativamente entre las pacientes con endometriosis y el grupo control. Ademas, la identificacion de las rutas metabolicas en las que participan dichos compuestos ha permitido establecer una relacion entre los perfiles metabolomicos y los mecanismos moleculares implicados en la endometriosis. Finalmente, el analisis por RMN de los distintos tipos de tejido relacionados con la endometriosis ha permitido su caracterizacion metabolica en mujeres con y sin endometriosis. Frente a la invasividad que implica el analisis de este tipo de muestras, la identificacion de alteraciones metabolicas asociadas a la endometriosis tiene un gran potencial para entender el metabolismo local e identificar la rutas bioquimicas implicadas en el desarrollo de la endometriosis. En estudio futuros, los perfiles metabolomicos de tejido podrian constituir una herramienta complementaria al analisis de biofluidos para el desarrollo de nuevos biomarcadores de diagnostico de la endometriosis.