Estudio de la expresión génica de diversos componentes del sistema fibrinolítico de las metaloproteasas y de la angiogénesis en la endometriosis. Correlación de los niveles de expresión con algunos polimorfismos estudiados

INTRODUCCIÓN: La endometriosis, definida como la presencia de tejido endometrial fuera del \nútero, es una de las enfermedades ginecológicas benignas más frecuentes. La endometriosis es una entidad \nmultifactorial y poligénica en la que tanto factores endometriales como peritoneales, relacionados con los \nsistemas de activación del plasminógeno (PA) y de las metaloproteasas (MMPs) y la angiogénesis, pueden \nestar implicados en esta enfermedad. \nOBJETIVO: Analizar los niveles de mRNA y proteína de factores angiogénicos (factor de \ncrecimiento del endotelio vascular, VEGF-A y trombospondina-1, TSP-1) y componentes de los sistemas \nPA (uroquinasa, uPA; inhibidor del PA tipo 1, PAI-1) y de las MMPs (MMP-3; inhibidor de MMPs de tipo \n1, TIMP-1) en tejido endometriósico y endometrio de mujeres con y sin endometriosis. También se \nestudiaron los niveles proteicos de estos componentes en el líquido peritoneal (LP) de pacientes y \ncontroles. Por otra parte, se estudiaron los polimorfismos 4G/5G del gen del PAI-1, 5A/6A del gen de la \nMMP-3 y tres polimorfismos funcionales del gen del VEGF-A (-460C/T, +405G/C y 936C/T) en pacientes \ny controles y se analizó la influencia de estos polimorfismos en la expresión de PAI-1, MMP-3 y VEGF-A \nen tejido endometrial y LP. Por último, se evaluó la influencia del LP sobre la expresión de factores \nproteolíticos y angiogénicos en cultivos de células endometriales procedentes de pacientes y controles. \nMÉTODOS: Los niveles de mRNA se cuantificaron mediante qRT-PCR en tiempo real y los niveles \nproteicos mediante ELISA. El polimorfismo 4G/5G del gen del PAI-1 se evaluó mediante PCR con \ncebadores específicos de alelo. El polimorfismo 5A/6A de la MMP-3 y los polimorfismos del VEGF-A se \ndeterminaron mediante PCR-RFLP. Por último, se aislaron y cultivaron células endometriales (de pacientes \ny controles) y se trataron con LP de pacientes y controles. Posteriormente, se evaluaron los niveles de \nmRNA y proteína de los factores estudiados. \nRESULTADOS y CONCLUSIONES: El endometrio y el LP de las mujeres con endometriosis \nmostró unos niveles de uPA, MMP-3 y VEGF-A superiores a los controles. Este incremento puede facilitar \nla adhesión del tejido endometrial al peritoneo y ovario, la invasión de la matriz extracelular y la \nangiogénesis, contribuyendo a la formación de las lesiones endometriósicas tempranas. El tejido \nendometriósico ovárico mostró unos niveles superiores de PAI-1, TIMP-1 y TSP-1 que el endometrio, lo \nque podría explicar la presencia del quiste endometriósico con ausencia de invasión al tejido ovárico \nadyacente. \nLas frecuencias genotípicas y alélicas del polimorfismo 4G/5G del gen del PAI-1 no difieren entre \npacientes y controles, aunque los niveles de PAI-1, en tejido endometrial y LP de controles, parecen estar \nasociados con este polimorfismo. \nLas pacientes mostraron una mayor frecuencia del alelo 936T, del gen del VEGF, que los controles. \nSin embargo no se encontraron diferencias en la distribución de frecuencias genotípicas y alélicas en los \notros dos polimorfismos del VEGF-A (-460C/T, +405G/C) entre pacientes y controles. Estos hallazgos \nsugieren que el polimorfismo 936C/T puede estar asociado con el riesgo de padecer endometriosis, aunque \nel incremento en los niveles de VEGF-A, observado en las mujeres con endometriosis, no parece estar \nasociado con ninguno de los polimorfismos estudiados. \nPor último, el LP de las mujeres con endometriosis indujo un incremento en los niveles de uPA y \nVEGF-A en cultivos de células endometriales de pacientes y controles. Los mayores niveles de uPA y \nVEGF-A se observaron en cultivos de células endometriales de pacientes tratados con LP de mujeres con \nendometriosis. Por tanto, el LP induce, en las células endometriales, una mayor expresión de factores \nproteolíticos y angiogénicos que pueden contribuir al desarrollo de las lesiones endometriósicas.